[1]李玢,于翠革,李连香,等.大型成年哺乳类动物绵羊阴道平滑肌细胞的原代培养改进方法研究[J].中国计划生育和妇产科,2016,(09):0.
　LI Fen,YU Cui-ge,LI Lian-xiang,et al.[J].Chinese Journal of Family Planning & Gynecotokology,2016,(09):0.
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大型成年哺乳类动物绵羊阴道平滑肌细胞的原代培养改进方法研究
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《中国计划生育和妇产科》[ISSN:1674-4020/CN:51-1708/R]

卷:
期数:
2016年09期
页码:
0
栏目:
论著与临床
出版日期:
2016-09-30

文章信息/Info

作者:
李玢; 于翠革; 李连香; 姜向阳; 刘晓英; 张璐
陕西省人民医院妇科；
Author(s):
LI Fen;YU Cui-ge;LI Lian-xiang;JIANG Xiang-yang;LIU Xiao-ying;ZHANG Lu;
Department of gynecology,People’s Hospital of Shaanxi;
关键词:
盆腔器官脱垂; 阴道平滑肌细胞; 原代培养; 动物模型
分类号:
R711.2
摘要:
目的探索原代培养成年大型哺乳动物绵羊阴道平滑肌细胞(vaginal smooth muscle cells,VSMC)改良方法。方法成年绵羊阴道平滑肌取材,利用预消化组织块法(将组织剪碎呈1 mm3大小组织块,0.1%Ⅰ型胶原酶消化20 min,0.1%胰酶-EDTA与0.1%Ⅰ型胶原酶混合溶液再次消化30 min,将组织块种于培养瓶)原代培养VSMC,并与传统组织块法和酶消化法进行细胞萌出速度及增殖速度比较,提高VSMC原代培养效率;免疫荧光染色法和western bloting法检测平滑肌细胞标志物calponin及a-SMA表达鉴定VSMC。结果预消化组织块法获得原代VSMC速度快于传统组织块法和酶消化法,3 d可见细胞萌出,9 d可达80%细胞融合,"峰谷"特征明显,而酶消化法至12 d增殖至80%细胞汇合,传统组织块法约7 d可见细胞萌出,14 d可达80%细胞汇合;VSMC平滑肌标志物calponin和a-SMA均呈阳性表达(P<0.05);VSMC可扩增代数有限,扩增7代后即表现出细胞形态改变,增殖缓慢,胞核内出现空泡,死亡细胞增加等表现。结论预消化组织块法可较快速多量获得绵羊VSMC。

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备注/Memo

备注/Memo:
国家自然科学基金青年项目(项目编号:81501238)
更新日期/Last Update: 2016-09-30